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RayBiotech抗体芯片在川崎病研究中的应用

发布日期:2018-01-22

杂志名称:Circulation research

 

文献题目:Ko T M, Kuo H C, Chang J S, etal. CXCL10/IP-10 is a Biomarker and Mediator for Kawasaki Disease[J].Circulation research, 2015, 116(5): 876-883.

 

第一作者:Tai-Ming Ko


作者单位:Institute of Biomedical Sciences  and Institute of Cellular and Organismic Biology


本实验所用产品:RayBiotech AAH-CYT-G8抗体芯片


实验样品:血浆

 

研究背景:

  川崎病(Kawasaki diseaes)又称皮肤粘膜淋巴结综合症(MCLS),是一种以全身血管炎变为主要病理的急性发热性出疹性小儿疾病。由于本病可发生严重心血管病变,引起人们重视,近年发病增多,川崎病已取代风湿热为我国小儿后天性心脏病的主要病因之一。目前认为川崎病是一种免疫介导的血管炎,目前对于KD的诊断非常的困难,本研究的目的是寻找一个生物标志物用于早期诊断。收集214个小儿发烧且有KD临床特征的血浆样本,其中100例确诊为KD。用抗体芯片筛查生物标志物,本论文分为3个阶段:发现、重复验证和盲法验证;在发现阶段,IL-17F, sCD40L, E-selectin, CCL23, CXCL10/IP-10在KD组显著上调,其中IP10的ROC分析结果显示IP-10对于诊断KD有很好的灵敏度和特异性。盲法验证也表明IP-10是KD的一个非常好的生物标志物。后续研究证明通过治疗后,KD病人的IP-10恢复正常水平,下游的IP-10受体以及CXCR3 在KD病人的T细胞中被激活。IP-10可以作为KD的一个便利的诊断标志物,且对KD的发病机制研究提供重要线索。

分组

KD病人血浆样品

非KD发热对照血浆样品

结果

2.1 RayBiotech抗体芯片筛查KD病人与对照血浆细胞因子差异

    RayBiotech人细胞因子抗体芯片检测筛查KD病人与对照血浆细胞因子差异,结果发现IL-9, IP-10, E-selectin, MPIF-1四个细胞因子在KD病人血浆中表达量升高,加大样品数量采用RayBiotech的ELISA验证,发现IL-9随着样品数量增多显著性差异消失,而IP-10, E-selectin, MPIF-1仍然是在KD组显著性升高。

2.2  IP-10的重复验证和ROC分析

    在几个候选生物标志物中,IP-10的变化幅度最大且统计学差异最为显著。加多样品数量再次验证,且ROC分析IP-10作为KD诊断标志物,灵敏度100%,特异性77%,线下面积AUC=0.94,具有非常好的判别效果。


2.3 IP-10作为诊断标志物的盲测验证

    盲法验证实验结果显示,IP-10 cutoff 值 1318 pg/mL可以很好的分辨23个KD病人和37个 non-KD 发热对照(sensitivity, 96% [22/23]; specificity, 81% [30/37])。


2.4 血浆IP-10水平与发热时间以及IVIG治疗前后的关系

    IP-10 cutoff值1318 pg/mL,81% KD病人可以在早期 (<4 days)被诊断出来, 96% KD病人可以在急性期(>5 days)被诊断出来。在IVIG治疗后,44例病人的IP-10水平恢复正常水平,而只有1例病人的IP-10在第一次治疗后没有变化,需要第二次治疗。


2.5 IP-10与KD的病理研究的关系

    IP-10可以下调T细胞表面CXCR3,为检测KD病人血浆中上调的IP-10对下游的机制影响,分析KD病人T细胞表面的CXCR3的水平变化,KD病人CXCR3表达量比正常对照表达量增加3.3倍,说明IP-10可能激活CXCR3信号通路,对KD的发生和发展起到关键作用。



结论

RayBiotech芯片的筛查结果为KD寻找到非常重要且便利的血浆生物标志物IP-10,且为KD病理研究和治疗研究提供重要研究线索。



RayBio作为国际领先的蛋白芯片和免疫产品专业供应商,拥有世界上种类最多的抗体芯片及ELISA及产品,其产品检测灵敏度高,种属多样,包括涵盖人、小鼠、大鼠、猪、马、牛、猴、犬、猫、兔等多个种属。 使用RayBio公司产品发表的文献达到数千篇。


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