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RayBiotech抗体芯片在遗传代谢疾病研究中的应用

发布日期:2018-01-22

杂志名称:Nature Communications


文献题目:LeeH, Lee J K, Park M H, et al. Pathological roles of the VEGF/SphK pathway inNiemann–Pick type C neurons[J]. Nature communications, 2014, 5


第一作者:LeeH

作者单位:Stem Cell Neuroplasticity Research Group, Kyungpook National University, Daegu 702-701, Korea

本实验所用产品:RayBiotech Mouse AAM-CYT-CUST抗体膜芯片20个定制细胞因子抗体芯片)

实验样品:细胞培养上清


研究背景:

    尼曼匹克氏病(Niemaoh-Pick disease)又称鞘磷脂沉积病(sphingomyelinlipidosis),属先天性糖脂代谢性疾病鞘氨醇积累的病理作用尚未被完全解析,本论文中研究者发现在NP-C病人成纤维细胞和NP-C小鼠(PNs)浦肯野神经细胞中由于VEGF的影响,鞘氨醇激酶(SphK)活性降低。鞘氨醇积累由于VEGF/SphK信号通路失活导致PNs减少,通过抑制的NP-C小鼠自噬体-溶酶体融合导致的PN损失。VEGF通过与VEGFR2结合后激活SphK,导致鞘氨醇存储减少,同时改进的PN细胞存活以及NP-C细胞和小鼠临床成效。研究结果还表明,从人类NP-C神经元细胞衍生的诱导性多功能干细胞(iPSC)中VEGF/SphK信号通路失活导致的异常是由VEGF补给修正。总的来说,这些结果揭示了NP-C的神经元致病机制,即SphK活性的降低是由于VEGF水平的受损。


1 结果

1.1 芯片样品准备

l  小鼠模型及细胞模型建立

l  BM-MSCsNP-C PNs共培养,提取培养上清

l  BM-MSCsWT PNs共培养,提取培养上清

1.2 共培养对鞘氨醇激酶(SphK)活性的影响

为了鉴定BM-MSCs(骨髓间充质干细胞)分泌的细胞因子是否会影响NP-C小鼠细胞的鞘氨醇激酶(SphK)活性,将BM-MSCs和NP-C小鼠(PNs)浦肯野神经细胞进行非接触式共培养,结果发现NP-C PNs的SphK活性显著增高,见下图。



结论

   RayBiotech芯片的筛查结果为尼曼匹克氏病鞘氨醇积累机制研究提供了非常重要指引作用,寻找到VEGF的变化对SphK活性有很大影响,对尼曼匹克氏病的病理研究和治疗研究起到重要作用。


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